고성능 액체 크로마토그래피

1. HPLC (고성능 액체 크로마토그래피) 원리 및 구성

• HPLC는 물질을 분리하고 분석하는 장비로, 액체 이동상을 이용하여 물질을 컬럼을 통해 분리합니다.
• 컬럼(Column): 물질의 성질에 따라 친화력이 다른 물질과 결합하여 분리하는 역할을 합니다. 물질의 극성과 비극성 정도에 따라 분리 효율이 달라지며, 수평 컬럼(친수성)과 기름 친화 컬럼(친유성)이 대표적입니다.
• 이동상: 컬럼에 흐르는 용매로, 물질을 컬럼에서 분리하여 추출하게끔 하는 역할을 합니다.
• 펌프(Pump): 이동상을 컬럼으로 지속적으로 흘려 보내는 장치입니다.
• 디텍터(Detector): 분리된 물질의 신호를 감지하여 데이터로 출력합니다. 검출기 종류에 따라 UV, 형광 검출기(FLD), 질량 분석기 등이 있습니다.

2. LC-MS/MS (액체 크로마토그래피-질량 분석기) 원리

• LC-MS/MS는 HPLC와 비슷하지만, 검출 단계에서 **질량 분석기(Mass Spectrometer)**를 사용하여 분리된 물질의 질량을 측정합니다. 이 장비는 다음과 같은 특징이 있습니다:
• 이온화 과정을 통해 기체 상태로 만든 물질이 질량 분석기에 들어가, 질량 대 전하 비율을 통해 분자 특성을 분석합니다.
• 고유의 질량비로 분석하여, 특정 물질을 더욱 정확하게 판별할 수 있습니다.

3. 시료 전처리 과정

• 시료 전처리는 실험 시료에서 원하는 물질을 추출하고 정제하는 과정입니다.
• 추출 (Extraction): 실험 대상에서 목표 물질을 녹여내기 위해 다양한 용매를 사용합니다.
• 정제 (Purification): 불필요한 성분을 제거하여 원하는 물질만을 분리합니다.
• 농축 (Concentration): 용매 양을 줄여 분석 물질의 농도를 높여줍니다.
• 필터링 (Filtering): 미세한 입자나 불순물을 제거하여 HPLC나 LC-MS/MS로 주입합니다.

4. 목적

• 약물의 반감기 측정을 위해 시료에서 약물을 분리하고 그 농도를 측정하는 용도로 사용합니다. 실험에 사용되는 표준 용액 및 표준 원액의 농도를 조절하여 반감기 측정을 위한 기준 데이터를 생성합니다.

5. 응용 사례

• 이 장비들은 축산물, 농약, 혈액 등의 약물 잔류량을 분석하는 데 주로 사용됩니다. 예를 들어, 축산물에서 항생제 잔류 여부를 검사하여 잔류 기준치를 설정하는 데 사용됩니다.

이 정리를 통해 HPLC와 LC-MS/MS 장비의 기본 원리와 실험 과정, 그리고 실습의 목적을 이해할 수 있을 것입니다.